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如何從液相色譜柱上去除樣品殘余物
更新時(shí)間:2019-09-11   點(diǎn)擊次數(shù):7291次

色譜柱是液相色譜的心臟,在液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透粉性,延長(zhǎng)柱子的使用壽命非常重要。因此對(duì)液相色譜柱的維護(hù)是關(guān)鍵。因?yàn)闃悠分薪?jīng)常會(huì)含有能夠吸附在色譜柱固定相上的雜質(zhì)化合物,所以應(yīng)該經(jīng)常對(duì)色譜柱進(jìn)行清洗或沖洗。當(dāng)色譜柱在多次進(jìn)樣后顯示出柱效降低時(shí),有必要采用適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相對(duì)色譜柱進(jìn)行處理,沖洗除去吸附在固定相上的污染物和樣品殘余物。

方法如下:

 

1.將色譜柱從系統(tǒng)上取下,反向連接到輸液泵上。色譜柱出口不要連接到檢測(cè) 器上,以免污染檢測(cè)器流動(dòng)池。

 

注意:大多數(shù)的硅膠基質(zhì)色譜柱反相沖洗沒有問題,但是聚合物基質(zhì)色譜柱并不能如此操作,在反相沖洗色譜柱之前后與色譜柱生產(chǎn)商確認(rèn),反向沖洗流動(dòng)相流速不要太大。

 

2.沖洗溶劑的選擇要考慮分析的樣品和使用的流動(dòng)相條件,一般清洗流動(dòng)相強(qiáng)度應(yīng)該比流動(dòng)相更強(qiáng),但是條件應(yīng)該盡可能的溫和。

A. 用適當(dāng)?shù)娜軇_洗色譜柱的鹽和強(qiáng)添加劑。

 

B. 用比分析流動(dòng)相更強(qiáng)的溶劑沖洗,該溶劑與流動(dòng)相組成相同但不含鹽和酸。

 

C. 如果認(rèn)為B沒能*清洗干凈色譜柱,用100%zui強(qiáng)溶劑沖洗。

 

在清洗色譜柱時(shí),用與流動(dòng)相組成相同的溶劑,但是如果使用其他的溶劑,重要的是要考慮到溶劑之間的互溶性,另外不要用強(qiáng)酸和強(qiáng)堿。

下圖是采用不同洗脫能力的流動(dòng)相沖洗色譜柱時(shí)的色譜圖,可見色譜柱上的雜質(zhì)逐漸被洗脫下來(lái)。

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